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執(zhí)業(yè)藥師考試藥物分析學(xué)：肝素生物檢定法

本法系比較肝素標(biāo)準(zhǔn)品（S）與供試品（T）延長(zhǎng)新鮮兔血或兔、豬血漿凝結(jié)時(shí)間的作用，以測(cè)定供試品的效價(jià)。

標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制

精密稱取肝素標(biāo)準(zhǔn)品適量，按標(biāo)示效價(jià)加滅菌水溶解使成每1ml中含100單位的溶液，分裝于適宜的容器內(nèi)，4～8℃貯存，如無沉淀析出，可在3個(gè)月內(nèi)使用。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的配制

試驗(yàn)當(dāng)日，精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按高、中、低劑量組（ds、ds、ds）用 0.9%氯化鈉溶液配成三種濃度的稀釋液，相鄰兩濃度的比值（r）應(yīng)相等。調(diào)節(jié)劑量使低劑量組各管的平均凝結(jié)時(shí)間較不加肝素對(duì)照管組明顯延長(zhǎng)。高劑量組各管的平均凝結(jié)時(shí)間，用新鮮兔血者，以不超過60分鐘為宜，其稀釋液一般可配成每1ml中含肝素2～5單位，r為1：0.7左右；用血漿者，以不超過30分鐘為宜，其稀釋液一般可配成每1ml中含肝素0.5～1.5單位，r為1∶0.85左右。

供試品溶液與稀釋液的配制

按供試品的標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià)（A），照標(biāo)準(zhǔn)品溶液與稀釋液的配制法配成高、中、低（dT、dT、 dT）三種濃度的稀釋液。相鄰兩濃度之比值（r）應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品相等，供試品與標(biāo)準(zhǔn)品各劑量組的凝結(jié)時(shí)間應(yīng)相近。

血漿的制備

迅速收集兔或豬血置預(yù)先放有8%枸櫞酸鈉溶液的容器中，枸櫞酸鈉溶液與血液容積之比為1：19，邊收集邊輕輕振搖，混勻，迅速離心約20分鐘（離心力不超過1500×g為宜，g為重力常數(shù)）。立即分出血漿，分成若干份分裝于適宜容器內(nèi)，低溫凍結(jié)貯存。臨用時(shí)置37±0.5℃水浴中融化，用兩層紗布或快速濾紙過濾，使用過程中在4～8℃放置。

檢定法

（1）新鮮兔血

取管徑均勻（0.8×3.8cm或1.0×7.5cm）、清潔干燥的小試管若干支，每管加入一種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品或供試品稀釋液0.1ml，每種濃度不得少于